快捷型植物基因組 DNA 提取試劑盒

適用范圍:植物 DNA 提取試劑盒組分：Buffer FA 80mlBuffer FB 28mlBuffer GE 20mlRnase A(10 mg/ml) 1.2ml 

保存條件：Buffer GE 4°CRnase A 4°C其它組分室溫保存

本試劑盒采用特*的緩沖液系統(tǒng)，特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取 基因組 DNA。無需酚/氯仿抽提，使用安全方便，可***限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中 其他有機化合物。對樣品的起始重量沒有限制，實驗者可根據(jù)自己的需求靈活調(diào)整。

提取的基因組 DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。 使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、 Southern雜交等實驗。

產(chǎn)品特點簡單快速：1h 內(nèi)即可獲得超純的基因組 DNA。廣泛：適用于各種植物組織。超純：獲得的 DNA 純度高，可直接用于 PCR、酶切、雜交等分子生物學實驗。 

注意事項1．樣品應(yīng)避免反復凍融，否則會導致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。2．Buffer FA 可能會發(fā)黃，并不影響提取效果。3．若緩沖液 FA 或 FB 有沉淀析出，可在 37℃水浴溶解，搖勻后使用。4．所有離心步驟均為使用臺式離心機，室溫下離心。操作步驟1．取植物新鮮組織 100 mg 或干重組織 20 mg，加入液氮充分碾磨。加入 400ul Buffer FA 和 6ul 的 Rnase A(10 mg/ml)，旋渦振蕩 1min，室溫放置 10min。注意：由于植物材料多樣性非常豐富，所取實驗材料的最適量需根據(jù)材料的不同，或相同材料的不同組織等進行摸索。。2．加入 130ul Buffer FB，充分混勻，渦旋振蕩 1min。3．14,000×g 離心 3min，將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。4．將上清液再次 14,000×g 離心 5min，將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。注意：此步驟目的為去除上清液中的沉淀雜質(zhì)，使提取基因組 DNA 純度更高。5．向上清液中加入 0.7 倍體積的異丙醇，充分混勻，此時會出現(xiàn)絮狀基因組 DNA。（例如 500ul 的上清液加 350ul 異丙醇），13,000×g 離心 2 min，棄上清，保留沉淀。6．加入 600ul 70%乙醇，渦旋振蕩 5sec，13,000×g 離心 2 min，棄上清。7．重復步驟 6。8．開蓋倒置，室溫 5-10 min，晾干殘余的乙醇。注意：乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR 等）實驗。9．加入適量 Buffer GE，65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA，其間顛倒混勻數(shù)次助溶。最終得到 DNA 溶液。DNA 濃度及純度檢測得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)?；厥盏玫降?DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA 應(yīng)在 OD260 處有顯著吸收峰，OD260 值為 1相當于大約 50ug/ml雙鏈 DNA、40 ug/ml 單鏈 DNA。OD260/OD280 比值應(yīng)為 1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用 ddH2O，比值會偏低，因為 pH 值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

上海牧榮生物科技有限公司

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