蛋白質(zhì)測定通常用于許多研究領(lǐng)域，以在大量緩沖液和條件下評估蛋白質(zhì)。研究人員面臨的一個(gè)主要問題是從市場上的大量選擇中選擇一種與他們的蛋白質(zhì)樣品兼容的蛋白質(zhì)檢測方法。CB-X蛋白質(zhì)分析解決了這個(gè)問題，因?yàn)樗O(shè)計(jì)為與蛋白質(zhì)分離、儲存和分析中所有常用的緩沖液和條件兼容。
對于簡單、不復(fù)雜的水性緩沖液中的蛋白質(zhì)樣品，CB-X是一種高靈敏度的單試劑檢測方法，可在5分鐘內(nèi)完成。CB-X蛋白質(zhì)分析使用的蛋白質(zhì)染料是對布拉德福德考馬斯染色試劑的改進(jìn)（圖1） 對于復(fù)雜的蛋白質(zhì)樣品，CB-X蛋白質(zhì)分析配備了用于清潔樣品的試劑，并去除所有干擾精確蛋白質(zhì)估計(jì)的試劑和化學(xué)物質(zhì)（圖1）。這些試劑包括去污劑、離液劑、還原劑、烷化劑、糖、高鹽濃度、緩沖劑和螯合劑（表1）。凈化階段和隨后的蛋白質(zhì)分析在單個(gè)試管中進(jìn)行，以確保無蛋白質(zhì)損失并保持分析的準(zhǔn)確性。圖2展示了1% Triton X-100或1% SDS存在時(shí)CB-X的效果。

如果蛋白質(zhì)樣品不含干擾物質(zhì)，則進(jìn)行簡單的單試劑檢測，以給出線性響應(yīng)。如果存在干擾物質(zhì)或產(chǎn)生人為結(jié)果，則用凈化試劑處理蛋白質(zhì)樣品，并檢測蛋白質(zhì)以產(chǎn)生線性響應(yīng)。

CB-X蛋白質(zhì)檢測隨特定批次的CB-X表格一起提供。這使得研究人員可以進(jìn)行單個(gè)蛋白質(zhì)的清理和后續(xù)分析，然后在CB-X表中查找它們的吸光度以找到蛋白質(zhì)濃度。CB-X工作臺消除了對多種蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的需求，節(jié)省了大量時(shí)間和精力。該表是由一種復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物制成的，與哺乳動物、植物、細(xì)菌和酵母來源的蛋白質(zhì)相當(dāng)。該檢測配有牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品或非動物蛋白標(biāo)準(zhǔn)和貓一起。# 786-12X或786-894，分別用于在單獨(dú)使用CB-X檢測染料時(shí)生成曲線，或用于喜歡根據(jù)特定條件生成自己的標(biāo)準(zhǔn)曲線或CB-X表格的研究人員。

CB-X蛋白質(zhì)檢測在每次檢測0.5-50 g的范圍內(nèi)是可靠的。常規(guī)大小的試劑盒包含足夠用于500次蛋白質(zhì)分析的CB-X分析染料和足夠用于250次凈化的凈化試劑。

 表1: CB-X蛋白質(zhì)分析與許多干擾試劑兼容 

特征

• 清潔步驟去除了所有干擾因素，包括洗滌劑和離液劑，從而提高了準(zhǔn)確性
• 在單個(gè)試管中進(jìn)行凈化和分析，以確保無蛋白質(zhì)損失
• 敏感:0.5-50克線性響應(yīng)
• 高可靠性和再現(xiàn)性
• 長保質(zhì)期-穩(wěn)定12個(gè)月

應(yīng)用程序

• 適用于大多數(shù)樣品（包括有問題的樣品）的改良、靈敏的布拉德福德檢測，與所有常見的實(shí)驗(yàn)室試劑兼容
• CB-X已被廣泛應(yīng)用于各種技術(shù)中（參考。1-6）和應(yīng)用包括:
• 蛋白質(zhì)估計(jì)在蛋白質(zhì)純化、電泳、免疫分析、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和其他研究中的應(yīng)用
• 含有常見實(shí)驗(yàn)室試劑、去污劑溶解的膜蛋白和稀釋蛋白溶液的蛋白質(zhì)樣品