簡要描述:H2S含量測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
H2S含量測定試劑盒
注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
H2S是一種新型氣態(tài)信號分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。
測定原理:
H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰,通過測定其吸光值可計(jì)算H2S含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體16mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:液體1.5mL×1管,4℃避光保存。
樣品處理:
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
血清(漿):直接測定。
操作表:
酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至665nm。
操作表
空白管 | 測定管 | |
樣品(μL) | 150 | |
H2O(μL) | 150 | |
試劑一(μL) | 150 | 150 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑二(μL) | 150 | 150 |
10000g,4℃,離心10min,去上清,留沉淀 | ||
H2O(μL) | 150 | 150 |
10000g,4℃,離心10min,去上清,留沉淀 | ||
試劑一(μL) | 75 | 75 |
試劑三(μL) | 75 | 75 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑四(μL) | 75 | 75 |
10000rpm,4℃,離心10min,吸取200μL上清于96孔板中 | ||
試劑五(μL) | 10 | 10 |
混勻,25℃靜置5min,測定665nm吸光值,記為A測定和A空白,ΔA=A測定-A空白。 |
H2S含量計(jì)算公式:
用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y = 0.0022x,R2 = 0.9988
(1)組織樣品
a.按照蛋白濃度計(jì)算
H2S(nmol/mg prot)=×V反總÷(V樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr
b.按照樣本重量計(jì)算
H2S(nmol/g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 681.8×ΔA÷W
(3) 細(xì)胞
H2S(nmol/104 cell)=×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè)))=681.8×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))
(2)液體樣品H2S(nmol/mL)=×V反總÷V樣= 681.8×ΔA
V反總:反應(yīng)總體積,0.225mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.15mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL
注意事項(xiàng)
*低檢出限為1nmol/mL。
上海牧榮生物科技有限公司
國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
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提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。
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公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
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公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。
H2S含量測定試劑盒
中文名稱:甲泛葡胺
英文名稱:Metrizamide
分子式:C18H22I3N3O8
分子量:789.1
CAS號:31112-62-6
級別:Reagent Grade
EINECS編號:250-475-5
儲(chǔ)存條件:2~8℃
中文別名:甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影
英文別名:2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco
是否危險(xiǎn):否
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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide
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