33d蜜桃成熟时,嫩草影院网站进入,极品无码AV国模在线观看,欧美午夜在线

您好!歡迎訪問(wèn)上海牧榮生物科技有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

17621170138

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色劑對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色 LumiTracker ER

用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色劑對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色 LumiTracker ER

更新時(shí)間:2024-03-14      點(diǎn)擊次數(shù):530

LumiTracker ER Green 和 LumiTracker ER Red 具有細(xì)胞滲透性,對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 染色劑具有高度選擇性,可用于活細(xì)胞成像。兩種 ER 染色劑都是 BDP 染料與格列本脲(格列本脲)偶聯(lián)的衍生物。格列本脲與 ATP 敏感鉀通道 (K ATP ) 的磺酰脲 (SUR) 受體結(jié)合,該受體在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上很突出。

用甲醛固定后,染色部分保留。 LumiTracker ER Green 和 LumiTracker ER Red 不適合對(duì)固定后的細(xì)胞進(jìn)行染色。

注意:格列本脲的藥理活性可能會(huì)影響 ER 功能。某些特殊細(xì)胞類型中磺脲類受體的可變表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致非 ER 標(biāo)記。

溶液的制備

1.1 庫(kù)存溶液的制備

  • 將 50 μg LumiTracker ER Green 溶解在 64 μL DMSO 中,以獲得 1 mM 儲(chǔ)備溶液。

  • 將 50 μg LumiTracker ER Red 溶解在 55 μL DMSO 中,以獲得 1 mM 儲(chǔ)備溶液。

注意:我們建議將儲(chǔ)備溶液儲(chǔ)存在?20°C或?80°C避光條件下。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1.2 工作液的配制

用鈣和鎂 (HBSS/Ca/Mg) 在 Hank's 平衡鹽溶液中稀釋 LumiTracker ER 染色劑的儲(chǔ)備溶液,以獲得工作溶液。使用 100 nM 至 1 μM 的濃度。 LumiTracker ER 染色劑的稀釋度取決于細(xì)胞類型和密度,應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。

細(xì)胞染色

2.1 懸浮細(xì)胞染色

  1. 1000 g離心細(xì)胞懸液 3-5 分鐘;棄去上清液。

  2. 用預(yù)熱的 HBSS 在 37°C 下清洗細(xì)胞兩次,每次 5 分鐘。

  3. 推薦的細(xì)胞密度為1×10 6 個(gè)細(xì)胞/mL。

  4. 將 1 mL 預(yù)熱的 LumiTracker ER 工作溶液添加到管中,并在 37 °C 和 5% CO 2下孵育細(xì)胞 15-30 分鐘

  5. 室溫下以 400 g離心細(xì)胞 3-4 分鐘;棄去上清液。

  6. 用培養(yǎng)基清洗染色細(xì)胞兩次。

  7. 用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞。

  8. 通過(guò)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞。

  9. 對(duì)于熒光顯微鏡,將一滴染色的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到載玻片上。用蓋玻片蓋住細(xì)胞。

2.2 貼壁細(xì)胞染色

  1. 在無(wú)菌蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞。

  2. 貼壁細(xì)胞可以直接在蓋玻片上染色。

  3. 從蓋玻片中吸出介質(zhì)。

  4. 用 37°C 預(yù)熱的 HBSS 沖洗細(xì)胞。

  5. 加入 100 μL 預(yù)熱的 LumiTracker ER 工作溶液,輕輕搖動(dòng)以全覆蓋細(xì)胞。在 37 °C 和 5% CO 2下孵育細(xì)胞 15-30 分鐘。

  6. 用培養(yǎng)基清洗染色細(xì)胞兩次。

  7. 如果通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),則需要在染色前重懸細(xì)胞。

  8. 對(duì)于熒光顯微鏡,將帶有染色細(xì)胞的蓋玻片翻轉(zhuǎn)到載玻片上,將它們放置在載玻片和蓋玻片之間。

細(xì)胞固定

  1. 如果要固定染色的細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)?4% 甲醛中于 4 °C 下孵育 2 分鐘。

  2. 固定細(xì)胞用 PBS 清洗兩次,每次 5 分鐘。

  3. 使用封固劑將細(xì)胞封固在蓋玻片下 。



掃一掃,關(guān)注微信
地址:上海市嘉定區(qū)安亭鎮(zhèn)新源路155弄16號(hào)新源商務(wù)樓718室 傳真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧榮生物科技有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備2022017655號(hào)-1
精品久久久久久久无码久中文字幕 | 又粗又大又爽又舒服日产| 成人英语| 久久久久亚洲精品无码蜜桃| 小14萝裸体洗澡视频免费网站| 欧美熟妇呻吟猛交xx性| 国产99视频精品免视看7| 偷看农村妇女牲交| 久久精品无码专区免费青青| 91精品国产色综合久久不卡蜜臀 | 欧美少妇| 久久综合五月天| 免费精品国产自产拍在线观看| 亚洲中文字幕一区精品自拍| 性色av无码免费一区二区三区| 久久不色| 成人试看| 99久久综合狠狠综合久久AⅤ| 日韩精品无码一区二区三区AV | h无码动漫在线观看| 亚洲色欲久久久久综合网| 精品国产在天天在线观看| 爽一点搔一点叫大声一点3p视频 | 日日天干夜夜狠狠爱| 成年无码av片在线免缓冲| 中文无码妇乱子伦视频| 孟州市| 国产精品2| 丁香久久| 亚洲AV高清一区二区三区| 国产精品特级露脸AV毛片| 久久久久久亚洲精品不卡| 丁香五月天综合缴情网| 亚洲欧美中文日韩V日本| 伊人色综合久久天天网| 含山县| 欧美人妻久久精品二区三区特黄 | 国产精品久久久久久网站| 欧洲精品无码一区二区三区在线播放| 性无码一区二区三区在线观看| av在线天堂av无码舔b|