該檢測試劑盒包含用于常規(guī)檢測蘇?;钚缘脑噭0K?;瘶擞洠ㄈ送負洚悩?gòu)酶 I 蛋白),以便清晰地檢測反應(yīng)。該測定已被證明適用于粗提物。強烈建議人 EI,活性 (Cat# P001;P006)、人 E II,活性 (Cat# P002;P011) 和人 SUMO I,活性 (Cat# P003;P012) 與該試劑盒一起使用。
K007 套件包含:
SAE I 和 SAE II(人類 EI)(目錄號 P006)
UBC9(人類 E II)(目錄號 P011)
SUMO I(主動形式)。 (目錄號 P012)
人類 DNA 拓撲異構(gòu)酶 I 片段。 (目錄號 B007)
抗拓撲異構(gòu)酶 I 抗體。 (目錄號 AP006)(凍干抗體應(yīng)在使用前用 100 ul H 2 O 復(fù)溶。)
10X 蘇酰化反應(yīng)緩沖液。 (目錄號 B006)(10x 緩沖液含有 200 mM Hepes pH 7.5、50 mM MgCl 2和 20 mM ATP。)
上述試劑適用于50次蘇?;磻?yīng)。
測定條件:
蘇?;瘻y定在含有20mM Hepes pH 7.5、5mM MgCl 2、2mM ATP的反應(yīng)緩沖液中以20ul的終體積進行。我們建議添加新鮮的 2mM ATP 以確保提供足夠的能量。
拓撲異構(gòu)酶 I 蘇?;刂品桨福?/strong>
添加 2 ul 50 kd 拓撲異構(gòu)酶 I 片段(目錄號 B007)作為每個反應(yīng)的底物。
在每個反應(yīng)中,首先將 2 ul E2 添加到底物中,然后添加 2 ul Sumo-1、2ul 10x 反應(yīng)緩沖液(目錄號 B006)、2ul E1 和 2 ul 20 mM ATP。最后,添加 H 2 O 使總體積達到 20 ul 。
LAE SUMO化蛋白的最佳反應(yīng)濃度如下: 對照測定的推薦條件是37 ℃,30~60分鐘。
EI:7.5微克/毫升
E II:50微克/毫升
SUMO-1:50微克/毫升
使用 10 ml 中提供的拓撲異構(gòu)酶 I 抗體(目錄號 AP006)稀釋 1000 倍進行蛋白質(zhì)印跡。應(yīng)檢測四個主要的SUMO化條帶。
使用 Topo-I 抗體(目錄號 AP006)對蘇酰化 50 Kd Topo-I 蛋白(目錄號 B007)進行蛋白質(zhì)印跡(12.5% 凝膠)。泳道 1:sumoylated 50Kd Topo-I 片段;泳道 2:未蘇?;?50Kd Topo-I 片段。
Topo-I 抗體 ( Cat#AP006)可以檢測到至少四個主要的蘇?;?Topo-I 片段 。
蘇?;桨福?/span>
準備合適的純化底物蛋白。
在每個反應(yīng)中,首先將 2 ul E2 添加到底物中,然后添加 2 ul Sumo-1、2 ul 10 x 反應(yīng)緩沖液、2 ul E1 和 2 ul 20 mM ATP。最后,添加 H 2 O 使最終體積達到 20 ul。
LAE蛋白的最佳反應(yīng)濃度如下:
EI:7.5微克/毫升
E II:50微克/毫升
SUMO-1:50微克/毫升
運輸/儲存:
該套件隨干冰一起運輸,應(yīng)儲存在 -70 o C 或更低的溫度下。
法律考慮:僅供研究使用。
LAE BIO是一家有前途的生物技術(shù)公司,致力于制造和開發(fā)最高質(zhì)量的 研究抗體和純化蛋白質(zhì)。我們創(chuàng)新的 線性陣列表位 (LAE) 技術(shù) 與眾不同我們來自所有其他抗體制造商。這項新技術(shù)結(jié)合了受體介導(dǎo)的攝取和有效的抗原呈遞,以誘導(dǎo)免疫反應(yīng),產(chǎn)生針對任何抗原(包括自身抗原)的抗體。先進技術(shù)與多年的抗原制備和蛋白質(zhì)純化經(jīng)驗相結(jié)合,確保我們以實惠的價格提供優(yōu)質(zhì)的抗體和蛋白質(zhì)。
我們專注于新型親和純化蛋白和參與 體外蘇?;钚詸z測的高度特異性抗體。我們可以為您提供全套蘇?;鞍?,包括SAEI/SAEII、UBC9、SUMO-1、SUMO-3,以便立即開始您的蘇酰化檢測。 為了篩選針對拓撲異構(gòu)酶的抗腫瘤藥物,我們提供人類 DNA 拓撲異構(gòu)酶 I、II a和 II b及其抗體。這些試劑包括 TOPO I、TOPO II a、TOPO II b、TOPO I Antibody F14、TOPO I Antibody T8N、TOPO I Assay Kit、TOPO I 藥物篩選試劑盒、TOPO II a 抗體和 TOPO II b 抗體。我們還提供蛋白激酶 A 催化亞基、DARPP-32、Phospho-DARPP-32、磷酸酶抑制劑-1、磷酸酶抑制劑-1、磷酸酶抑制劑-2、磷酸酶抑制劑-2 Ab,供您研究多巴胺能功能腦。