借助我們的肽受體 easYmers®,您可以構(gòu)建與您的項目相關(guān)的 MHC I 類存儲庫,并開始在您自己的實驗室中生產(chǎn) pMHC 復(fù)合物。有超過 50 種 HLA 同種異型可供選擇。
所有 MHC I 類 easYmer® 分子均經(jīng)過生物素化,允許您使用您喜歡的標(biāo)簽制備四聚體。冷凍保存,MHC I 類 easYmers® 穩(wěn)定且肽可接受 24 個月;一旦與肽復(fù)合,所得單體可在冰箱中穩(wěn)定保存多年。 我們建議您使用預(yù)測因子(例如NetMHC 系列或NetMHCpan)作為設(shè)計單體的輔助工具。如果目標(biāo)特定肽-MHC I 類組合預(yù)計不會以足夠低的 %Rank 結(jié)合,則該肽不支持穩(wěn)定復(fù)合物形成的風(fēng)險很高。因此,為了確保正確的肽加載和 CD8+ T 細(xì)胞的最佳染色,我們強(qiáng)烈建議您通過實驗驗證肽-MHC (pMHC) 復(fù)合物的成功形成。為此,easYmer 試劑盒包含一個基于 FACS 的簡單方案,允許您驗證正確的肽加載(單擊此處了解方案)。 裝載肽的 MHC 單體可以長期冷凍保存以供以后四聚化。當(dāng)需要時,這些單體可以很容易地與標(biāo)記的鏈霉親和素(例如用于經(jīng)典流式細(xì)胞術(shù)分析的熒光團(tuán)標(biāo)記或用于CyTOF分析的金屬標(biāo)記)四聚化。為了獲得最佳的 CD8+ T 細(xì)胞 HLA 四聚體染色效果,請遵循我們的MHC I 類四聚體染色方案。 easYmers® 技術(shù)具有高度靈活性,適用于: 肽-MHC I 類相互作用的評估。 表位/新表位篩選——小規(guī)模四聚體生產(chǎn),用于并行篩選大量不同的表位。 供體篩選——大規(guī)模四聚體生產(chǎn),用于篩選大量(供體)樣本中的單個表位。 50+ HLA-A | HLA-B |提供 HLA-C 同種異型 鼠標(biāo) H2-Db、H2-Kb 可用
將肽添加至 easYmer® 并孵育。添加鏈霉親和素綴合物并對 T 細(xì)胞進(jìn)行染色。