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bocsciences化學(xué)發(fā)光底物詳細(xì)介紹

更新時(shí)間:2023-06-06      點(diǎn)擊次數(shù):1036

化學(xué)發(fā)光是一種伴隨化學(xué)反應(yīng)的發(fā)光現(xiàn)象。 化學(xué)發(fā)光底物,也稱為化學(xué)發(fā)光劑,是在化學(xué)反應(yīng)中傳遞能量并以光的形式釋放能量的試劑。化學(xué)發(fā)光底物是檢測(cè)蛋白質(zhì)和核酸的重要工具。常用的化學(xué)發(fā)光劑有三種:酶促反應(yīng)用發(fā)光底物的發(fā)光劑、直接化學(xué)發(fā)光劑和電化學(xué)發(fā)光劑。這些物質(zhì)具有一些共同特征:

  1. 它們可以參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng),具有很高的發(fā)光量子產(chǎn)率。

  2. 它們可以與抗原或抗體偶聯(lián)并形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物。

  3. 它們不會(huì)改變或很少改變標(biāo)志物的物理和化學(xué)性質(zhì),尤其是免疫活性。

  4. 其應(yīng)用的濃度范圍不應(yīng)對(duì)生物體有毒

用于酶促反應(yīng)的發(fā)光底物的發(fā)光劑

酶催化發(fā)光反應(yīng)是一種通過(guò)酶的降解發(fā)光的反應(yīng)。從技術(shù)上講,它是一種酶聯(lián)免疫測(cè)定法,使用發(fā)光化學(xué)物質(zhì)作為底物而不是顯色劑。 使用廣泛的酶是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)。HRP可與基材魯米諾及其衍生物一起使用,或 p-羥基苯y(tǒng)i酸(p-HPA)。堿性磷酸酶可與底物金剛烷基1,2-二氧雜環(huán)丁烷芳基磷酸酯(AMPPD)或4-甲基傘形磷酸酯(4-MUP)一起使用。

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直接化學(xué)發(fā)光劑

直接化學(xué)發(fā)光劑直接參與發(fā)光反應(yīng)。它們?cè)诨瘜W(xué)結(jié)構(gòu)中具有特定的基團(tuán),可以通過(guò)簡(jiǎn)單地改變?nèi)芤旱膒H值而不是酶促反應(yīng)來(lái)發(fā)光。吖啶酯(AE)是目前常用的直接化學(xué)發(fā)光劑,具有穩(wěn)定性高、背景低、信噪比高、發(fā)光快、發(fā)光效率高等優(yōu)點(diǎn)。

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電化學(xué)發(fā)光劑

電化學(xué)發(fā)光是在電極上產(chǎn)生的物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)并通過(guò)電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)發(fā)光的過(guò)程。電化學(xué)發(fā)光劑不直接參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng),主要用作能量轉(zhuǎn)移的催化劑或載體。這種藥劑的典型代表是釕(II)三(聯(lián)吡啶)2+ 3 NHS酯。電化學(xué)發(fā)光工藝既可以提高反應(yīng)底物的穩(wěn)定性,又可以增強(qiáng)靈敏度。

根據(jù)化學(xué)發(fā)光底物的特性,科學(xué)家開(kāi)發(fā)了一種稱為化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定(CLIA)的先進(jìn)技術(shù)。 CLIA具有廣泛的應(yīng)用。它不僅可以定量或定性地檢測(cè)抗原、半抗原和抗體,還可以檢測(cè)核酸探針。與放射免疫測(cè)定(RIA)、免疫熒光測(cè)定(IFA)和酶免疫測(cè)定(EIA)相比,CLIA具有無(wú)輻射、標(biāo)記物有效期長(zhǎng)、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。因此,CLIA被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品檢測(cè)等科學(xué)研究。


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